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    组织消化酶Ⅱ说明书02.14-02.pdf

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    2023-02-17 13:35:59
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产品说明
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使用说明
产品说明

本产品包括种种酶法组织消化中常用的胶原酶等卵白酶,能特异性地降解胞外胶原卵白,使胶原卵白和纤维粘连卵白的网状结构解离,而不损坏细胞外貌结构的完整性。使用本产品进行组织消化可以使组织中细胞间的桥连结构松动,使组织由块状酿成絮状,经过机械奏乐后制成少量细胞群团和大宗单个细胞的细胞悬液。制备的细胞悬液可用于原代培养、流式细胞仪进行细胞生物学(如凋亡、增殖、细胞周期等)研究。适用规模:种种正常乳腺和乳腺肿瘤组织,从中疏散获得原代细胞,包括上皮细胞,间质细胞,成纤维细胞等。

使用说明

-20℃避光生存6个月内有效。

(1)提前将消化酶从-20℃冰箱取出置于2-8℃融化;

(2)将冰盒外貌消毒后移入超净台内。在无菌条件下,冰上在培养皿中将组织样本置于组织清洗液内清洗3~5 s。

(3)在无菌条件下,将清洗后的组织样本浸没在盛有10 ml组织清洗液的培养皿中。冰上接纳无菌手术刀将样本机械切割成1~2 mm3巨细后,将样品碎块转移至50 mL无菌离心管中; 

(4)加入10~20 mL组织清洗液于离心管中,1200 rpm 4℃离心5 min;

(5)弃上清,加入10~30 mL本消化酶(消化酶体积至少为组织体积的5倍),标记样本名称及编号并用封口膜封口,放入恒温振荡培养箱中消化,设置参数37 ℃、100~200 rpm(凭据样实质地设置转速),待组织消化至泛起团絮状(一般1小时左右),即可终止消化;

(6)取出消化好的样本,加入5 mL含血清DMEM培养基,100 μm细胞筛网过滤。

(7)将过筛后的细胞悬液于350 g常温离心5 min。

(8)弃上清后,细胞沉淀加入原代细胞培养基待用。 

注意事项

1. 本产品通例在-20℃生存。使用前需在2-8℃融化,融化后需在一周内使用完毕。

2. 使用本产品时应注意无菌操作,制止污染。

3. 为坚持本产品的最佳使用效果,一般在37℃条件下使用,凭据具体实验情况也可在2-8℃条件下使用。

4. 本产品的消化时间需要凭据样品巨细进行摸索,关于珍贵样品,为抵达最佳的疏散效果,可接纳二次分步消化方法(即将首次消化的组织残渣收集后,重复如上操作办法1~8)。

5. 请于保质期内使用本产品,凌驾保质期后,将无法抵达理想的使用效果。

6. 本产品仅用于科研用途,不可用于体外诊断。

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