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原代乳腺上皮细胞完全培养基

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    原代乳腺上皮细胞完全培养基说明书02.14-02.pdf

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    2023-02-17 13:35:28
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产品说明
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使用说明
产品说明

  乳腺上皮细胞完全培养基是一种增进人乳腺原代上皮细胞体外生长的培养基。该产品是一种无菌的液体混淆系统,含有维持目的细胞生长所必须的氨基酸、维生素、有机和无机化合物以及生长因子等。培养基基于碳酸氢盐的缓冲体系,在5% CO2/95%空气的培养箱中平衡时,pH值为7.4。该培养基的配方可以提供一个合适的营养情况,选择性地增进体外人乳腺原代上皮细胞的生长和扩增。

使用说明

  4℃避光生存1个月内有效。

  1.乳腺癌原代细胞培养

  接纳预冷的DMEM/F-12培养基将细胞外基质胶(Corning#356231)按1:50比例稀释,至少提前30 min将稀释后的基质胶预铺在培养瓶/板底部外貌,并使其完全笼罩底部外貌,30~60 min后吸干备用。将疏散并计数后的细胞悬液接种于培养瓶/板,补加完全培养基至所需体积,轻轻摇晃混匀,外貌消毒后置于培养箱,37 ℃ 、5 % CO2条件下进行培养;原代细胞首次接种后2-3 天内勿动(利于细胞贴壁)。

  2.原代乳腺上皮细胞传代

  镜下视察细胞形成克隆,且汇合度达80~90%时即可传代。培养箱中取出细胞,弃去旧培养液,加入适量TrypLE™ Express酶(Gibco#12605010)37℃孵育,10~20 min后取出,轻拍培养瓶/板侧面,显微镜下视察细胞消化情况。细胞消化至细胞变圆并开始脱落时用含10%胎牛血清的DMEM培养基终止消化,并将细胞转移至离心管中,室温,300 g,离心5 min;弃上清,以1-2 mL完全培养基重悬细胞,活细胞计数,将细胞悬液按适合的细胞密度接种于预铺有基质胶的培养瓶/板底部,预铺要领同办法1。补加完全培养基至所需体积,轻轻摇晃混匀,外貌消毒后置于培养箱,37 ℃ 、5 % CO2条件下继续培养。

要害词:
原代乳腺上皮细胞完全培养基
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